注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:甲型流感病毒亞型PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣
英文名稱:Influenza Virus AM2RTPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
甲型流感病毒亞型PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
澳洲茄堿英文名: Solasonine CAS登錄號(hào): 19121-58-5 分子式: C45H73NO16 分子量: 883.49 分子結(jié)構(gòu):
安格洛苷C英文名: Angoroside C CAS登錄號(hào): 115909-22-3 分子式: C36H48O19 分子量: 784.28 分子結(jié)構(gòu):
澤瀉醇B醋酸酯中文別名: 澤瀉醇B-23-醋酸酯,澤瀉醇B單乙酸酯,乙酸澤瀉醇B酯 英文名: Alisol B 23-acetate 英文別名: Alisol B 23-monoacetate; Alisol B monoacetate CAS登錄號(hào): 26575-95-1 分子式: C32H50O5
異烏藥內(nèi)酯中文別名: 異烏藥醚內(nèi)酯 英文名: Isolinderalactone CAS登錄號(hào): 728-61-0 分子式: C15H16O3 分子量: 244.29
洋川芎內(nèi)酯I英文名: Senkyunolide I CAS登錄號(hào): 94596-28-8 分子式: C12H16O4 分子量: 224.25 分子結(jié)構(gòu):
洋川芎內(nèi)酯H英文名: Senkyunolide H CAS登錄號(hào): 94596-27-7 分子式: C12H16O4 分子量: 224.25 分子結(jié)構(gòu):
洋川芎內(nèi)酯A英文名: Senkyunolide A 英文別名: Sedanenolide; Senkyunolide CAS登錄號(hào): 62006-39-7 分子式: C12H16O2 分子量: 192.25
鹽酸石蒜堿中文別名: 石蒜堿鹽酸鹽 英文名: Lycorine chloride 英文別名: Licorin hydrochloride; Lycorine hydrochloride CAS登錄號(hào): 2188-68-3 分子式: C16H18ClNO4
延齡草苷中文別名: 地索苷 英文名: Diosgenin glucoside 英文別名: Funkioside A; Lilioglycoside A; Melongoside B; Polygonatoside A; Polyphyllin A CAS登錄號(hào): 14144-06-0 分子式: C33H52O8
亞麻木酚素中文別名: 亞麻木脂素;亞麻木脂素 英文名: Secoisolariciresinol Diglucoside 英文別名: Seco-isolariciresinol diglucoside; SDG; 2,3-Bis(3-methoxy-4-hydroxybenzyl)butane-1,4-diol 1,4-diglucoside CAS登錄號(hào): 148244-82-0 分子式: C32H46O16
香紫蘇醇中文別名: (1R,2R,8aS)-十氫-1-(3-羥基-3-甲基-4-戊烯基)-2,5,5,8a-四甲基-2-萘醇 英文名: Sclareol CAS登錄號(hào): 515-03-7 分子式: C20H36O2 分子量: 308.29
甲型流感病毒亞型PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣FMOC-D-亮氨酸,5g3,3',5,5'-Tetra-tert-butyldiphenoquinone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
FMOC-L-甲硫氨酸,100g1-(tert-butyl)pyrrolidin-2-one 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
FMOC-L-甲硫氨酸,25g4-Methylsulphonylbenzoic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
FMOC-L-甲硫氨酸,500g2-(9H-Fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-hydroxy-butanoic acid 質(zhì)量規(guī)格:Purity>97%,Potency920ug/mg,USP
FMOC-L-甲硫氨酸,5gTetrabutylammonium acetate 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定
FMOC-D-甲硫氨酸,1gIsonicotinamide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
FMOC-D-甲硫氨酸,25g4-Hydrazino-6-methylpyrimidin-2-amine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
FMOC-D-甲硫氨酸,5gEupalinolide A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
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