注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:犬血支原體PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣(mài)
英文名稱:Mycoplasma haemocanisPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
犬血支原體PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣(mài)原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
SDS-PAGE蛋白質(zhì)次高分子標(biāo)準(zhǔn) 其他英文名稱: SDS-PAGE Molecular hight weight markers for proteins 產(chǎn)品規(guī)格: 43000~200000,粉末,5條帶 包裝: 10次/支 分子量范圍:43000~200000道爾頓規(guī)格:粉末的10次/100ug/支;液體的10次/100ul/支兔肌球蛋白:分子量200000道爾頓;20μg
SDS-PAGE蛋白質(zhì)中分子量 英文名稱: Middle range protein MW marker 產(chǎn)品規(guī)格: 53000~212000,凍干粉 包裝: 175ug/支 分子量范圍:53000~212000道爾頓級(jí)別:BR規(guī)格:175ug/支
低范圍RNA Ladder 產(chǎn)品規(guī)格: 100~1000 包裝: 100微升 級(jí)別:BR 分子量范圍:100~1000產(chǎn)品描述:The RiboRuler Low range RNA Ladder is a mixture of seven chromatography-purified single-stranded RNA transcripts.The RNA concentration of each ladder band is precisely measured by spectrophotometry,which makes this ladder ideal for approximate RNA quantification on gels.The RiboRulerTM Low range RNA Ladder is recommended for electrophoresis in the following:native 2% agarose with TAE buffer,denaturing formaldehyde agarose with MOPS buffer,denaturing glyoxal/DMSO agarose with sodium phosphate buffer and denaturing polyacrylamide gel electrophoresis in TBE bufferThe ladder is supplied with 2×RNA Loading Dye solution
50bp DNA Ladder 產(chǎn)品規(guī)格: 50~500 包裝: 50次/300ul/支 級(jí)別:即用型規(guī)格:50次/300ul/支分子量范圍:50~500參考片段:50、100、150、200、250、300、400、500
100bp DNA Ladder I 產(chǎn)品規(guī)格: 100~1500 包裝: 100次/500ul/支 級(jí)別:即用型規(guī)格:100次/500ul/支分子量范圍:100~1500參考片段:100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500
100bp DNA Ladder Ⅱ 產(chǎn)品規(guī)格: 100~3000 包裝: 50次/300ul/支 級(jí)別:即用型規(guī)格:50次/300ul/支分子量范圍:100~3000參考片段:100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、3000
植物血球凝集素 英文名稱: PHA 其他名稱: Phytohemagglutinin 產(chǎn)品規(guī)格: BR 包裝: 1克 CAS號(hào):9008-97-3 相對(duì)分子量:121000~132000
植物血球凝集素PHA-P 其他名稱: 植物血凝素 英文名稱: Phytohemagglutinin PHA-P 其他名稱: Lectin from Phaseolus vulgaris (red kidney bean) 產(chǎn)品規(guī)格: BR,<62.5 μg/ml 包裝: 100毫克/500毫克 CAS號(hào):9008-97-3
犬血支原體PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣(mài)4'-Methylacetanilide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
3-Aminophenylacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品
trans-4-Isopropylcyclohexane carboxylic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
BOC-L-Methionine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Dimethylamine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
4,4'-Methylenebis(N,N-diglycidylaniline) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
(R)-4-AMINO-3-(4-CHLOROPHENYL)BUTANOIC ACID 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
4-Azabenzimidazole 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
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