型 號(hào)
產(chǎn)品時(shí)間2024-02-05
所屬分類人原代細(xì)胞
報(bào)價(jià)2600
人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性：
| 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | 形態(tài) | 梭形、多角形細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng) |
| 貨號(hào) | EY-XY3211 | 種屬來(lái)源 | 人 |
| 組織來(lái)源 | 椎間盤(pán)組織 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
| 形態(tài)特征 | 梭形、多角形細(xì)胞樣 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
培養(yǎng)基：人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)環(huán)境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃
傳代特征：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
細(xì)胞名稱
質(zhì)量檢測(cè)人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
消化液0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨，1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹：
| 人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)。人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞分離椎間盤(pán)組織；椎間盤(pán)是位于脊柱兩椎體之間，分為中央部的髓核，富于彈性的膠狀物質(zhì)；周圍部的纖維環(huán)，由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來(lái)。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。髓核，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤(pán)結(jié)構(gòu)的一部分，位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯(cuò)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時(shí)期的髓核含水量為80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生時(shí)體積大而松散，位于椎間盤(pán)的中央，至成年時(shí)位置移至椎間盤(pán)的中后部；在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長(zhǎng)，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐漸減少，膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。 |
原代細(xì)胞的分離培養(yǎng)：
原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官，讓它們?cè)隗w外維持與生長(zhǎng)。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開(kāi)機(jī)體，它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變，在一定程度上可反映它們?cè)隗w內(nèi)的狀態(tài)，表現(xiàn)出來(lái)源組織或細(xì)胞的特性， 因此用于藥物實(shí)驗(yàn)，尤其是藥物對(duì)細(xì)胞活動(dòng)、結(jié)構(gòu)、代謝、有無(wú)毒性或殺傷作用等，是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
（一）組織塊培養(yǎng)法
許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng)，因?yàn)榉椒ê?jiǎn)單，細(xì)胞也較容易生長(zhǎng)。尤其是培養(yǎng)心肌，有時(shí)還可觀察到心肌組織塊搏動(dòng)。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長(zhǎng)出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后， 即可進(jìn)行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺(tái)／無(wú)菌間、無(wú)菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
（1） 在無(wú)菌條件下，取待培養(yǎng)的組織適量，置入小燒杯中， 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次，去掉組織塊表面的血污。
（2）用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
（3）再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗， 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉，將燒杯傾斜，用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
（4）用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml）的培養(yǎng)液再清洗，用吸管吸干后加入5ml 含20％血清的培養(yǎng)液。
（5）用彎頭吸管吸取組織小塊，均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面，吸去多余的培養(yǎng)液，各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋，做好標(biāo)記， 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
（6） 2~4h 后，于超凈工作臺(tái)中，緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20％血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml ）的培養(yǎng)液少量，以使組織塊浸沒(méi)在培養(yǎng)液中。
（7）輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱， 如無(wú)特殊情況，不必觀察。1~2 周后，可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長(zhǎng)出，形成生長(zhǎng)暈。
（9） 一般說(shuō)來(lái)，若培養(yǎng)液無(wú)明顯改變， 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長(zhǎng)滿整個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)表面，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
操作方法：
組織塊直接培養(yǎng)法（原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)）
材料與儀器
【動(dòng)物】選擇大約一半足孕時(shí)間的胚胎，10－13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞，成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個(gè)【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺(tái)中有以下物品：1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS)1瓶；100ml 0.25%瓶；PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個(gè)；3、50ml離心筒2個(gè)4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)5、1ml，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊；7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；8、酒精燈1臺(tái)；
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動(dòng)物(倉(cāng)鼠、小鼠和大鼠)2)將1－2個(gè)胚胎轉(zhuǎn)移至一個(gè)小的無(wú)菌培養(yǎng)皿中，用新的無(wú)菌剪刀小心地絞碎胚胎，用PBS漂洗。3)在無(wú)菌狀態(tài)下，將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無(wú)菌離心筒中,加入40ml 0.25％的無(wú)菌,用攪拌棒輕輕攪動(dòng)。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動(dòng)15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降，將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無(wú)菌50ml的離心管中，該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見(jiàn)前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來(lái)的50ml離心筒中，重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液，1200r/rain，5分鐘，棄上清。8)用新鮮的無(wú)菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞，按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。
公司正在出售的產(chǎn)品：
| 楊氏檸檬酸桿菌 | 人惡性黑色素瘤細(xì)胞 |
| 志賀氏菌屬 | 人黑色素瘤細(xì)胞 |
| 弗氏耶爾森菌 | 人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞 |
| 丙酸桿菌 | 人急性淋巴白血病細(xì)胞 |
| 梅氏弧菌 | 人黑色瘤細(xì)胞系 |
| 有毒威克斯菌 | 人肝腹水腺癌細(xì)胞 |
| 莫拉氏菌屬 | 人卵巢腺癌細(xì)胞 |
| 霍利斯格里蒙菌 | 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 |
| 嗜溫鞘氨醇桿菌 | 人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
| 植物乳球菌 | 人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 |
| 美人魚(yú)發(fā)光桿菌美人魚(yú)亞種 | 人皮膚鱗癌細(xì)胞 |
| 耳炎差異球菌 | 人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 |
| 弗氏檸檬酸桿菌 | 急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
| 殺鮭氣單胞菌日本鮭亞種 | 人子宮頸鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞 |
| Bacillus megaterium | 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 |
| Luteimonas composti | 人腎腺癌細(xì)胞 |
| Bacillus firmus | 人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞 |
| Acidovorax soli | 人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞 |
| Chryseobacterium ureilyticum | 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 |
| Luteimonas marina | 人胎盤(pán)絨膜癌細(xì)胞 |
| Arthrobacter tecti | 人涎腺癌細(xì)胞 |
| Bacillus niacini | COC1細(xì)胞耐藥亞株 |
| Arthrobacter niigatensis | Hela細(xì)胞耐藥亞株 |
| Bacillus cereus | 人T淋巴瘤細(xì)胞 |
| Pseudomonas otitidis | 人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞 |
| Streptomyces thermocarboxydus | 人小腸癌細(xì)胞 |
| Bacillus magaterium | 人急性早幼粒白血病細(xì)胞 |
| Bacillus marisflavi | 人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞人喉癌上皮細(xì)胞 |
| Cellulosimicrobium funkei | 人膀胱移行細(xì)胞癌 |
| Bacillus flexus | 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 |
| Bacillus subtilis | 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 |
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